畜牧兽医学报 ›› 2014, Vol. 45 ›› Issue (12): 1949-1956.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.12.006
王梦楠1,崔亚丽2,吴国江1,李冬杰3,李世杰1*
收稿日期:
2014-04-23
出版日期:
2014-12-23
发布日期:
2014-12-23
通讯作者:
李世杰,博士生导师,教授,主要从事动物转基因克隆技术、动物分子遗传和基因工程药物研究,E-mail:lishijie20005@163.com
作者简介:
王梦楠(1989-),女,河北人,硕士,主要从事基因工程、生物化学与分子生物学方面的研究,E-mail:wangmengnan814@163.com
基金资助:
国家自然科学基金(31372312);河北省自然基金项目(C2011204001)
WANG Meng-nan1,CUI Ya-li2,WU Guo-jiang1,LI Dong-jie3,LI Shi-jie1*
Received:
2014-04-23
Online:
2014-12-23
Published:
2014-12-23
摘要:
为探讨Ascl2基因在成年牛不同组织中的印记状态,并揭示DNA甲基化在调控Ascl2基因印记中的可能作用。本研究首先应用基于核苷酸多态的RT-PCR产物直接测序法对Ascl2基因在牛7个组织(心、肝、脾、肺、肾、肌肉和脂肪)中的表达及印记状态进行了分析,进一步应用亚硫酸氢盐测序法分析牛肺、肝和肾组织中Ascl2基因启动子区的等位基因特异的甲基化状态。RT-PCR产物测序结果显示,Ascl2基因印记表现出组织特异性,在肺和肝中为单等位基因表达,而在心、脾、肾、肌肉和脂肪5个组织中为双等位基因表达。亚硫酸氢盐测序发现,在Ascl2单等位基因表达的肺和肝中,2条亲本链的甲基化水平存在极显著差异(P<0.01), A链的甲基化水平(61.21%、87.28%)显著高于G链(24.70%、25.61%);而在Ascl2双等位基因表达的肾组织中,A链(54.70%)与G链(49.55%)的平均甲基化水平差异不显著(P >0.05)。以上结果表明,Ascl2基因启动子区DNA的甲基化修饰调控Ascl2基因的印记表达。
中图分类号:
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